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大鼠elisa試劑盒使用期間注意事項

瀏覽次數(shù):1104發(fā)布日期:2021-07-20
  大鼠elisa試劑盒采用基于雙抗體夾心法的酶聯(lián)免疫吸附檢測技術。將抗大鼠IL-4單克隆抗體包被在酶標板上;分別加入梯度稀釋的標準品和預稀釋的樣本,標準品和樣本中的大鼠IL-4會與酶標板上的包被抗體充分結(jié)合;洗板后加入生物素化抗大鼠IL-4抗體,該抗體會與板子上包被抗體捕獲的標準品和樣本中的大鼠IL-4發(fā)生特異性結(jié)合;洗板后加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的鏈霉親和素,生物素與鏈霉親和素會發(fā)生高強度的非共價結(jié)合;洗板后加入顯色劑底物TMB,若反應孔中樣品存在不同濃度的大鼠IL-4,則HRP會使無色TMB變成不同深淺(正相關)的藍色物質(zhì),加入終止液后反應孔會變成黃色;在2max=450nm(OD=450nm)處測定反應孔樣品吸光度(OD),樣本中的大鼠IL-4濃度與OD成正比,通過繪制標準曲線和四參數(shù)擬合軟件便可計算出樣本中大鼠IL-4的濃度。
  大鼠elisa試劑盒注意事項:
  1.試劑盒應在有效期內(nèi)使用,請不要使用過期的試劑。
  2.試劑盒未使用時應保存在2-8℃冰箱,已復溶但未用完的標準品,請丟棄。
  3.試劑盒使用前請在室溫恢復30min,且充分混勻試劑盒里的各種成份及制備的樣品。
  4.在試驗中標準品和樣本建議作復孔檢測,且加入試劑的順序應保持一致。
  5.為避免交叉污染,請在試驗中使用1次性試管,槍頭,封板膜及潔凈塑料容器。
  6.濃縮生物素化抗體和濃縮酶結(jié)合物的體積較少,在運輸過程中微量液體會沾到管壁及瓶蓋上,使用前請離心處理(5-10S即可),使管壁上的液體集中在管底部,取用時,請用移液器小心吹打幾次。
  7.除了試劑盒中的濃縮洗滌液和終止液可以通用外,請不要使用其他來源試劑盒內(nèi)含的試劑代替本試劑盒中的某單個組分。
  8.為保證結(jié)果準確,每次檢測均需做標準曲線。
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